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伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠

簡要描述:伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠是 粒徑為200 nm 的納米磁珠表面上共價結(jié)合了大量的伴刀豆球蛋白A(ConA)納米級磁珠提供的超大比表面積,具有更多的結(jié)合位點,磁珠使用量更少,非特異性吸附率低。

  • 產(chǎn)品型號:AP62L222
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-09-06
  • 訪  問  量:196

詳細(xì)介紹

品牌Life-iLab/李記生物貨號AP62L222
供貨周期現(xiàn)貨應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

產(chǎn)品描述

伴刀豆球蛋白A(ConA)磁珠是 粒徑為200 nm 的納米磁珠表面上共價結(jié)合了大量的伴刀豆球蛋白A(ConA)納米級磁珠提供的超大比表面積,具有更多的結(jié)合位點,磁珠使用量更少,非特異性吸附率低。用于分離細(xì)胞或從血清和細(xì)胞提取物中分離糖蛋白,并可以借助磁力架等磁分離設(shè)備非常便捷地應(yīng)用于分離糖蛋白,CUT&RUN CUT&Tag 等相關(guān)實驗。

訂購信息

產(chǎn)品名稱

貨號

規(guī)格

伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠

AP62L222

1 mL

運輸與保存

藍(lán)冰運輸。4℃保存,有效期12個月。注:避免凍融或離心磁珠。

技術(shù)參數(shù)

基質(zhì)

硅基磁珠

配體

伴刀豆球蛋白A(ConA)

粒徑

200nm

磁珠濃度

10mg/mL

結(jié)合能力

≥0.9mg 糖蛋白/mL磁珠

適用范圍

分離糖蛋白,CUT&RUN,CUT&Tag

使用方法

自備試劑

緩沖液

配方

結(jié)合緩沖液

1×PBS, 1mM MgCl2,   1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4)

洗滌緩沖液

1×PBS, 1mM MgCl2,   1mM MnCl2, 1mM CaCl2 (pH7.4), 0.1% Tween 20

洗脫緩沖液

5mM Tris(pH   8.0), 0.15M NaCl, 0.05% SDS,1M Glucose

1.樣本處理

(1) 準(zhǔn)備哺乳動物細(xì)胞(1.0×104~1.0×105個),離心收集(4℃,600×g,3-5min),小心吸棄上清;

(2) 加入 500 μL 結(jié)合緩沖液,充分混勻重懸細(xì)胞,離心收集(4℃,600×g,3-5min),小心吸棄上清;

(3) 加入 200-500 μL結(jié)合緩沖液,同時加入蛋白酶抑制劑,充分混勻,重懸細(xì)胞。

2.磁珠預(yù)處理

(4) 用移液器輕柔吹打伴刀豆球蛋白A磁珠 ,使其充分混勻,取10 µL磁珠懸液(可酌情調(diào)整磁珠用量)置于新的 1.5 mL離心管中,接著在磁力架上靜置 1 min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,吸棄上清;

(5) 加入 500μL 結(jié)合緩沖液 ,用移液器輕柔吹打重懸磁珠,接著在磁力架上靜置 1 min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,吸棄上清;

(6) 重復(fù)上個步驟(5)一次,注:面對多個樣品時,可先將總共所需的磁珠預(yù)處理后再分裝到各個反應(yīng)管中。

3.樣品的結(jié)合

(7) 在預(yù)處理后的磁珠中加入步驟3處理后的細(xì)胞樣本混合,置于旋轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫30min),接著在磁力架上靜置 1min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,小心吸棄上清,離心管中剩余的即為蛋白-磁珠復(fù)合物;

4.洗滌

(8) 在步驟(7)得到的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入500 μL洗滌緩沖液,用移液器輕柔吹打磁珠,并置于旋轉(zhuǎn)混勻儀上孵育5min,接著在磁力架上靜置1min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,吸棄上清。再重復(fù)此步驟兩次;

5.蛋白洗脫

(9) 在步驟(8)得到的蛋白-磁珠復(fù)合物中加入50~250 μL洗脫緩沖液,置于翻轉(zhuǎn)混合儀上孵育(常溫10-30 min),接著在磁力架上靜置 1 min,待磁珠吸附到離心管側(cè)壁上后,收集上清,即為目的蛋白。收集上清,即為目的蛋白。若洗脫效果不佳,可重復(fù)洗脫一次,或者增加孵育時間。

注意事項

1.   本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2.   請勿高速離心、干燥或冷凍磁珠,這些操作會導(dǎo)致磁珠聚集而降低結(jié)合能力。

3.   避免使用含有 EDTA 或其它金屬螯合劑的試劑,否則會降低磁珠與蛋白的結(jié)合效率 。

4.   磁珠使用前應(yīng)充分振蕩均勻。磁珠應(yīng)保存在儲存溶液中,防止干燥。

相關(guān)產(chǎn)品推薦

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。


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